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WTM-8040G
灵芝多糖的提取
近年来,药理学和免疫学的多方研究表明,灵芝多糖芝扶正固本有效的成分之一,具有广泛的药理活性,排毒、抗放射,提高肝脏、骨髓合成dna、bna的能力,抗肿瘤增强机体免疫等效果。因此多糖的提取为广大科研人员药研制者所重视,他们不断研究和探索灵芝多糖提取的方为弄清灵芝多糖的化学成分提供有力的理论依据,同时为许多疾病患者带来福音。
一 、酸提法
有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。将热水浸提过的阿魏侧耳子实体残渣加8倍量的3%的三氯乙酸浸提,15℃过夜,过滤,离心,将提取液用20%的NaOH中和至pH为7,浓缩、醇析沉淀、丙酮洗涤、真空冷冻干燥得酸提水溶性粗多糖PFA.从对海蒿子多糖的提取方法研究发现,从硫酸根含量及粗多糖产率看,酸提方法优于水提方法。
其具体酸提方法如下:取100g海蒿子干粉,加入1000ml0.1mol/LHCl溶液提取,室温搅拌1h后过滤,重复操作三遍,合并滤液滤液减压浓缩至总体积的1/5,再加入95%乙醇至乙醇浓度达30%,沉淀,离心除去沉淀中的褐藻酸。继续向上清液中加入乙醇至乙醇浓度达70%,室温放置过夜使沉淀完全,离心,沉淀干燥得海蒿子粗多糖C2.多次试验算得平均产率为3.35%.在茜草多糖提取研究中,发现相对于水提,以稀酸提取茜草多糖,产品纯度较高。具体方法如下:茜草根粗粉1000g,5%HC1浸泡,离心,取上清液加入EtOH并调节至浓度为70%,静置,2500rpm离心,收集棕色沉淀物,95%EtOH洗涤3次,以4%HCl溶解,加1%活性炭脱色,真空抽滤,滤液过夜,弃去容器底部少许沉淀物,溶液置透析袋内,逆水法透析3日,冷冻干燥,得白色粉末约10g(多糖A)。酸提法有其特殊性,只在一些特定的植物多糖提取中占有优势,报道的并不多。而且即使有优势,在操作上还应严格控制酸度,因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。
二 、碱提法
与酸提类似,有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。采用稀碱提取:多为0.1mol/L氢氧化钠、氢氧化钾,为防止多糖降解,常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。HayashiKatsuhiko发明了从绿色藻类中提取酸性多糖的方法,而种多糖用常规的热水法是无法得到的。具体过程为:将干燥的绿藻粉末制成浮液,热水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分离,取黏稠的固状物,加入碱水,在pH3.0的条件下再行搅拌提取,碱水提取液在搅拌的同时加入酸水调节pH值至3~4,静置沉降后离心得酸性多糖。同样,碱提优势也是因多糖类的不同而异。与酸提类似,碱提中碱的浓度也应得到有效控制,因为有些多糖在碱性较强时会水解。另外,稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。分别称取4种动物材料3份,每份50g,做平行实验:加100mL0.1mol/LNaOH溶液,在60℃水浴中保温24h,冷却后,用三氯乙酸调pH至4左右,6000r/min离心l5min,取上清液加2倍体积乙醇摇匀,出现絮状沉淀后静置,取沉淀加适量90%乙醇振荡,静置,倒出上清液。用无水乙醇处理2次,过滤,沉淀再用无水乙醇洗2次,将沉淀摊于平皿上50℃烘干,得粗品。粗品经糖含量、蛋白含量测定后,加入适量水重新溶解,加0.5倍体积酒精摇匀,静置片刻后,6000r/min离心15min,除去蛋白杂质。上清液中再加入酒精,至乙醇体积分数约60%,摇匀后静置,待沉淀后,小心将上清液倒出,沉淀中加入适量90%酒精和无水乙醇2次脱水,过滤后沉淀再用无水乙醇洗2次,摊于平皿上,50℃烘干,得到多糖精品。
三、超滤法
膜分离技术被公认为现代分离技术领域中进的技术之一,已广泛应用于化工、电子、环保、医药等领域。超滤(Ultrafiltration,UF)是膜分离科学的重要分支,其原理是以选择性透过膜为分离介质,在外界压力作用下,原料组分选择性地透过膜,以达到分离、提纯的目的。将超滤膜用于多糖这种生物活性物质的分离,不损害活性、分离效率高、能耗低、设备简单、可连续生产、无污染等。
四、膜技术简介
杭州沃腾膜工程有限公司以技术的进步推动工业提纯理论的变革和发展,推动膜提纯浓缩技术从实验室试验技术到产业化应用过度,并成功的实现了工业级,规模化分类提纯制备。以自主创新的形式实现了对广义目标提取物有效的,产业化,工业级工艺流程解决方案。